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    KlenTaq-S 測(cè)序酶

    簡(jiǎn)要描述:KlenTaq-S 測(cè)序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):代理商
    • 更新時(shí)間:2026-01-05
    • 訪  問  量:2556

    詳細(xì)介紹

    品牌BIOHUB供貨周期兩周

    本公司 KlenTaq-S 測(cè)序酶是重組表達(dá),并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。

    活性定義活性單位指在 72℃下, 1×AM PCR Buffer 130 min 內(nèi)將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。特點(diǎn)

    1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應(yīng)

    2.相比全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶,本酶比活性有所降低

    適用范圍

    ddNTP 終止法DNA 測(cè)序(一代測(cè)序

    焦磷酸解反應(yīng)延伸法 SNP 分析

    質(zhì)量控制

    經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。

    酶貯存緩沖液

    20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

    應(yīng)用舉例

    以下反應(yīng)舉例為 50 μl 標(biāo)準(zhǔn) PCR 體系,僅供參考。實(shí)際 PCR 條件應(yīng)根據(jù)模板、引物、目的片段大小加以優(yōu)化,確定最佳反應(yīng)條件。

    1) 按下表配制反應(yīng)體系

    組份 

    體積/μl

    終濃度 

    10×AM PCR Buffer 1

    5

    dNTPs2.0 mM

    5

    0.2 mM

    引物 F10 μM

    1.5

    0.3 μM

    引物R10 μM

    1.5

    0.3 μM

    Template

    Varable*

    /

    KlenTaq-S測(cè)序酶(5U/μl

    0.5

    2.5U

    ddH2O

    Varable

    /

    總體積

    50

    /

    *模板DNA用量參數(shù)(50 μl反應(yīng)體系):

    人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng;PCR產(chǎn)物 1 ng-10 ng Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

     

    2) 按如下條件進(jìn)行反應(yīng),

    95

    2-5 min


    95

    15 sec

     

    25-35 Cycles

    55~72

    20 sec

    72

    1kb/min

    72

    5 min


    3) 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR 產(chǎn)物,或按實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。

    注意事項(xiàng)1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似,對(duì)特定 DNA 的測(cè)序反應(yīng)可能需要優(yōu)化。2.本酶擴(kuò)增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,PCR 產(chǎn)量有所降低,不建議用于常規(guī) PCR3.不可用于 Taqman 探針法 q-PCR


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