Polyplus Transfection 特約代理

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公司：www.polyplus-transfection。。ｃｏｍ

PolyPlus-transfection（PT）是一家位于法國的生物技術(shù)公司，目前已經(jīng)通過了ISO9001:2000質(zhì)量體系認(rèn)證。該公司擁有十幾年的的轉(zhuǎn)染試劑研發(fā)經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了一系列的轉(zhuǎn)染試劑，如：基因的體內(nèi)和體外轉(zhuǎn)染試劑、寡核苷酸轉(zhuǎn)染試劑和siRNA轉(zhuǎn)染試劑等，可以根據(jù)不同的需要獲得穩(wěn)定或瞬時的轉(zhuǎn)染效果。
JetPEITM轉(zhuǎn)染試劑
該試劑是陽離子化的大分子多聚乙烯亞胺（PEI）及其衍生物，其與外源基因結(jié)合形成顆粒狀，與細(xì)胞表面的蛋白多糖結(jié)合，通過細(xì)胞"內(nèi)吞作用"進(jìn)入細(xì)胞。PEI-復(fù)合體具有質(zhì)子海綿的特性，能吸收溶酶體的H+，在復(fù)合體中形成酸性環(huán)境使核酸酶失活，保護(hù)DNA免受核酸酶的降解。進(jìn)入細(xì)胞后，JetPEI復(fù)合體囊泡腫脹破裂，將DNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
特點：
l 轉(zhuǎn)染效率高，重復(fù)性好
l 可轉(zhuǎn)染許多種細(xì)胞系，對粘附細(xì)胞和懸浮細(xì)胞同樣有效
l 對原代細(xì)胞也具有很好的轉(zhuǎn)染結(jié)果
l 也可以轉(zhuǎn)染寡核苷酸
l 培養(yǎng)基可含或不含血清
l 極低的細(xì)胞毒性
l 方法簡便，省時省力
基本步驟
1） JetPEI溶液2μl和質(zhì)粒DNA 1μg混合5-30分鐘。
2） 將JetPEI-DNA復(fù)合體溶液加入到細(xì)胞液中（可以在含血清的培養(yǎng)基中）。
3） 檢測
N/P比率（影響轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵）
N/P比率是對JetPEI復(fù)合體的所帶電荷的度量。它指的是DNA分子帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)與JetPEI中N殘基的摩爾比，是衡量核酸與轉(zhuǎn)染試劑比例的參數(shù)。從理論上講，JetPEI/DNA復(fù)合體的電中性為N/P=2-3，但實際操作時，N/P=5-10效果較好。
轉(zhuǎn)染試劑的類型
1．JetPEI轉(zhuǎn)染試劑
JetPEI是PolyPlus-transfection的主導(dǎo)產(chǎn)品，毒性低，對細(xì)胞不會造成傷害。它能把基因轉(zhuǎn)入各種粘附或懸浮的細(xì)胞系中以及原代細(xì)胞。
2．In vivo-JetPEI轉(zhuǎn)染試劑
通過靜脈、大腦、腹膜以及氣管等體內(nèi)途徑進(jìn)行轉(zhuǎn)染，目前已在小鼠、大鼠、鴨、豚鼠和猴等動物身上取得成功。
3．Tagged JetPEIs：細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染試劑
Tagged JetPEIs是偶聯(lián)有配體的PEI衍生物，可將基因轉(zhuǎn)入特殊的細(xì)胞。
1） JetPEI-Gal & in vivo-JetPEI-Gal（肝細(xì)胞介導(dǎo)）
PEI衍生物，偶聯(lián)有半乳糖。受體細(xì)胞：細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖特異性膜血凝素的細(xì)胞，如肝細(xì)胞。
2） JetPEI-Man & in vivo-JetPEI-Man（樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞）
PEI衍生物，偶聯(lián)有甘露糖。受體細(xì)胞：細(xì)胞表面表達(dá)甘露糖特異性受體的細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。
3） JetPEI-RGD（上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞）
PEI衍生物，偶聯(lián)有RGD肽鏈。受體細(xì)胞：細(xì)胞表面表達(dá)整合素的細(xì)胞，如上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。 4．Fluo JetPEI：熒光轉(zhuǎn)染試劑
1） JetPEI- FluoF
PEI衍生物，偶聯(lián)熒光素FluoF（激發(fā)波長490nm，發(fā)射波長520nm），通常用于胞內(nèi)定位研究，適于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀的檢測。
2） JetPEI- FluoR
PEI衍生物，偶聯(lián)四甲基羅丹明FluoR（激發(fā)波長555nm，發(fā)射波長580nm），常用于雙色標(biāo)記和協(xié)同定位的實驗中，如用于綠色熒光蛋白或FITC標(biāo)記的質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。
3） In vivo-JetPEI-FluoF & In vivo-JetPEI-FluoR
PolyPlus-transfection也提供體內(nèi)轉(zhuǎn)染的熒光試劑，常用于生物分布研究。
5．JetPEI-Biotin和in vivo-JetPEI-Biotin
PEI衍生物，偶聯(lián)Biotin，通過鏈親和素檢測JetPEI/DNA在細(xì)胞內(nèi)的定位和分布。

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上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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