D-熒光素鉀鹽代理

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·         詳細(xì)信息：

·         D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽;
分子式：NaC₁₁H₇N₂O₃S₂·H₂O 分子量：320.32 g/mol 純度：高級純（99.7%）
應(yīng)用：1）活細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析；
2）廣泛用于報告基因分析，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析；
Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 體外生物發(fā)光檢測
1）配制成100 mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。
2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配制工作液(終濃度150μg/mL)。
3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
4）圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強(qiáng)信號）。
Protocol 2：In vivo analysis in mice / 小鼠活體成像分析
1）用無菌的DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL)，0.2um濾膜過濾除菌。一旦使用，保持冰冷且避光。
2）按10 μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應(yīng)量的15mg/mL熒光素溶液；
3）腹腔注射10-15 min后進(jìn)行成像分析。（對每只動物模型做熒光素動力學(xué)研究以確定峰值信號獲取時間）
使用熒光素發(fā)表的文獻(xiàn)：
1. Barth et al. Molecular Therapy. 2008, 16. 957-964.
2. Mahller et al. Cancer Research. 2008, 68 (4). 1170-1179.
3. Marques et al. Journal of Neurovirology. 2008, 14 (3). 229-238.
4. Stish et al. J. Neurooncol. 2008, 61 (1). 51-61.
5. Zhang et al. Cancer Research. 2007, 67. 9389-9397. 6. Baia, G. et al, Brain Pathology, 2007, 18 (2), 172-179.
7. Barth, A. et al, Molecular Therapy, 2008, 16 (5), 957-964.
8. Su Y. et al. Clinical and Experimental Metastasis, 2009

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：楊建輝

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