BIOHUB●78BEA10011●熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)【產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)】

??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

- 貨號(hào)：78BEA10011  

- 中文名：熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)  

- 品牌：BIOHUB

- 規(guī)格：25 kU

- 儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期3年  

- 適用領(lǐng)域：病毒載體生產(chǎn)、蛋白純化、mNGS樣本處理等  

??詳細(xì)介紹  

1?? 產(chǎn)品特性  

HL-SAN是一種重組非特異性內(nèi)切酶，由畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn) 。其核心特性包括：  

- 高鹽耐受性：在0.5 M NaCl條件下活性最佳，可耐受高達(dá)1 M NaCl 。  

- 快速滅活：通過(guò)添加DTT或TCEP（還原劑）即可不可逆失活，50℃孵育30分鐘滅活率>99% 。  

- 廣譜活性：可降解單鏈/雙鏈DNA及RNA，產(chǎn)物為5-7 nt寡核苷酸 。  

2?? 技術(shù)參數(shù)  

- 比活度：≥175,000 Units/mg（基于小牛胸腺DNA標(biāo)準(zhǔn)） 。  

- 酶活定義：37℃下30分鐘消化50 μg/ml DNA（OD260增加1.0） 。  

- pH范圍：7.5-9.5（最佳pH 9.0） 。  

- Mg2?需求：1-20 mM（最佳濃度5-20 mM） 。  

3?? 應(yīng)用場(chǎng)景  

- 病毒載體生產(chǎn)：AAV/rAAV載體純化中去除宿主DNA，符合FDA<10ng/dose標(biāo)準(zhǔn) 。  

- mNGS樣本處理：快速裂解宿主細(xì)胞，提升病原微生物檢出靈敏度（如下呼吸道感染檢測(cè)） 。  

- 蛋白純化：清除DNA結(jié)合蛋白雜質(zhì)，優(yōu)化下游工藝 。  

??核心優(yōu)勢(shì)  

? 高鹽環(huán)境下的優(yōu)秀性能  

- 常規(guī)核酸酶（如Benzonase）在>100 mM鹽濃度時(shí)失活，而HL-SAN在0.5 M NaCl下活性達(dá)峰值，顯著提升復(fù)雜體系（如AAV裂解液）的核酸去除效率 。  

? 智能滅活設(shè)計(jì)  

- 通過(guò)添加DTT（1-5 mM）或TCEP（1-10 mM）即可滅活，無(wú)需加熱或超濾，簡(jiǎn)化工藝流程 。  

? 合規(guī)性與安全性  

- 支持GMP生產(chǎn)，提供完整的COA、MSDS及可追溯文件 。  

- 不含Triton X-100，符合歐盟環(huán)保法規(guī) 。  

? 高性價(jià)比  

- 比活度達(dá)175,000 U/mg，單位成本低于同類產(chǎn)品30% 。  

?常見(jiàn)問(wèn)題與解答  

- Q1：HL - SAN 與普通核酸酶有何區(qū)別？

A1： HL - SAN 專為高鹽設(shè)計(jì)，在高鹽濃度下仍能保持高效活性，而普通核酸酶在高鹽環(huán)境下活性會(huì)大幅下降，無(wú)法滿足高鹽條件下去除宿主 DNA 等需求。

- Q2：滅活后是否殘留酶活性？

A2： 添加 10mM DTT 或 TCEP 后，5 分鐘內(nèi)即可實(shí)現(xiàn)不可逆滅活，無(wú)殘留風(fēng)險(xiǎn)，這樣就能避免殘留酶對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)流程造成干擾。

- Q3：是否支持凍干工藝？

A3： HL - SAN 可凍干保存，復(fù)溶后活性穩(wěn)定，適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存，這大大提高了產(chǎn)品的便利性和使用壽命，滿足不同的使用和保存需求。

- Q4：推薦使用濃度是多少？

A4： 宿主 DNA 清除推薦 1000U/ml，不過(guò)具體的使用濃度還需根據(jù)樣本類型進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，以達(dá)到最佳的實(shí)驗(yàn)效果。

- Q5：是否適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞樣本？

A5： 是的，可高效去除哺乳動(dòng)物基因組 DNA，適用于 mNGS 和病原檢測(cè)，適用范圍廣泛，能滿足多種實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)需求。

- Q6：在病毒載體生產(chǎn)中如何發(fā)揮作用？

A6： 在病毒載體生產(chǎn)如 AAV/AdV 病毒包裝后，能有效清除宿主 DNA，滿足 FDA/NMPA 對(duì) HCD（宿主細(xì)胞 DNA）的嚴(yán)格管控要求，確保病毒載體的質(zhì)量和安全性，對(duì)病毒載體的后續(xù)應(yīng)用和審批等環(huán)節(jié)具有重要意義。

- Q7：在 mNGS 樣本處理中的優(yōu)勢(shì)是什么？

A7： 能去除人體宿主 DNA，從而提升病原微生物檢測(cè)靈敏度，有助于更準(zhǔn)確地檢測(cè)和分析樣本中的病原微生物，為疾病的診斷和治療提供更可靠的依據(jù)。

- Q8：在蛋白純化中的作用機(jī)制是怎樣的？

A8： 可清除 DNA 結(jié)合蛋白，提高目標(biāo)蛋白純度，通過(guò)去除與蛋白結(jié)合的 DNA，減少雜質(zhì)干擾，使目標(biāo)蛋白更容易被純化和分離，提高蛋白純化的效率和質(zhì)量。

- Q9：酶的等電點(diǎn)是多少？

A9： pI 為 9.6，這一特性使其容易跟絕大多數(shù)蛋白分離，方便在復(fù)雜的生物樣品中將酶與其他蛋白成分區(qū)分開(kāi)來(lái)，有利于后續(xù)的純化和分析等工作。

- Q10：在不同溫度下的穩(wěn)定性如何？

A10： 熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)具有熱不穩(wěn)定性，在 37℃環(huán)境下保溫 30 分鐘后活性會(huì)降至 10%，在 42℃環(huán)境下保溫 30 分鐘后活性會(huì)降至 1% 以下，這種熱不穩(wěn)定性特點(diǎn)可在特定的溫度條件下方便地實(shí)現(xiàn)酶的滅活，為實(shí)驗(yàn)流程的控制提供了便利。

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