HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶：耐高鹽，助力蛋白純化研究

在蛋白質(zhì)純化、病毒載體制備等生物醫(yī)藥研究生產(chǎn)過(guò)程中，核酸污染，尤其是宿主基因組DNA污染是一個(gè)非常關(guān)鍵的問(wèn)題。宿主DNA的殘留不僅會(huì)影響目標(biāo)產(chǎn)物的純化效果，還可能引發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)，因此受到嚴(yán)格監(jiān)管。傳統(tǒng)核酸酶在高鹽條件下活性較弱，而 HL-SAN 25k 作為一種耐高鹽的非特異性核酸內(nèi)切酶，在高鹽濃度（如 0.5 M NaCl）下表現(xiàn)出優(yōu)異的活性，能夠高效去除宿主DNA。

作為arcticzymes公司中國(guó)經(jīng)銷商，上海起發(fā)強(qiáng)烈推薦arcticzymes熱銷產(chǎn)品HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

HL-SAN是一種非特異性內(nèi)切核酸酶，適用于高鹽濃度下的核酸去除。該酶能夠在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中去除污染的核酸，同時(shí)保護(hù)蛋白質(zhì)的完整性。它能夠以大約10:1的比例消化DNA和RNA。

酶學(xué)特性

   來(lái)源：重組表達(dá)于畢赤酵母細(xì)胞。

   酶比活：≥1.75×105 Units/mg。

   酶活定義：在37℃，25 mM Tris-HCl（pH 8.5），5mM MgCl2，500 mM NaCl的反應(yīng)體系中，1個(gè)單位的HL-SAN在30分鐘內(nèi)消化50 µg/ml的小牛胸腺DNA，可以在OD260nm處產(chǎn)生1A的吸光值變化。

   特異性：非特異性內(nèi)切核酸酶，能夠?qū)捂満碗p鏈DNA及RNA消化成5-13個(gè)堿基的寡核苷酸。

最佳活性條件

   溫度：7-38℃和4°C過(guò)夜，最佳溫度為30-38℃。

   鹽濃度：0-1000 mM(NaCl/KCl)，最佳濃度為400-700 mM。

   pH范圍：6.8-9.5，最佳pH為8.0-8.9。

  Mg2+濃度：>1 mM，最佳濃度為5-50 mM。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

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   非特異性內(nèi)切核酸酶，適用于高鹽濃度（0.5 M NaCl）下的核酸去除。

   在低溫（6℃）下仍保持20%的活性。

   寬pH范圍和溫度穩(wěn)定性。

   適用于高鹽緩沖液中的核酸去除。

應(yīng)用領(lǐng)域

   蛋白純化：高效去除與蛋白質(zhì)結(jié)合的核酸，尤其適用于DNA結(jié)合蛋白。

   病毒載體制備：如腺相關(guān)病毒（AAV）和腺病毒（AdV）。

   宏基因組測(cè)序（mNGS）：去除宿主DNA，提高病原體檢測(cè)效率。

   其他應(yīng)用：降低樣品粘度，去除核酸污染。

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實(shí)驗(yàn)展示

       圖左：通過(guò)未釋裂解液和His-trap洗脫液的瓊脂糖凝膠電泳顯示，在這兩種情況下，大部分DNA仍保留在其中，添加了HL-SAN極大地減少了粗裂解液中的DNA含量

       圖右：通過(guò)qPCR檢測(cè)His-trap洗脫液中的大腸桿菌23S DNA，結(jié)果顯示添加了HL-SAN將DNA含量減少了約10,000倍。

   圖2：與未處理的樣品相比，在裂解液中添加了HL-SAN處理的DNA將10,000倍流速減少；洗脫液中減少約為200倍。而同時(shí)處理裂解液和洗脫液，添加了HL-SAN可將DNA減少約4,000倍。

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