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AssayGenie高靈敏度脂肪酸氧化 (FAO) 檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用
脂肪酸每碳提供的ATP比葡萄糖等碳水化合物多。 在具有高能量需求的組織中，例如心臟組織，高達(dá) 50 - 70%的能量來(lái)自脂肪酸β-氧化，可轉(zhuǎn)化脂肪 酸制乙酰輔酶A，同時(shí)產(chǎn)生FADH2和NADH 線粒體。
這種嚴(yán)格的有氧氧化途徑由四個(gè)不同的步驟組成： 酰基輔酶A脫氫酶脫氫，烯酰輔酶A水合 水合酶，通過(guò) 3-羥基酰輔酶 A 脫氫酶和硫解酶脫氫 β-酮硫醇酶裂解。
研究脂肪酸氧化的重要性
β-氧化系統(tǒng)在人體中的重要性體現(xiàn)在 存在一組被歸類(lèi)為脂肪酸氧化的遺傳疾病 疾病（FAOD），這是一組異質(zhì)性脂肪酸缺陷 轉(zhuǎn)運(yùn)和氧化，并遺傳為常染色體隱性遺傳病， 具有廣泛的臨床表現(xiàn)。
此外，有證據(jù)表明，糧農(nóng)組織在糧農(nóng)組織活動(dòng)期間的監(jiān)管 胎兒發(fā)育不僅對(duì)胎兒生命很重要，而且 對(duì)成年期健康和疾病的影響。糧農(nóng)組織的衡量標(biāo)準(zhǔn) 因此，活動(dòng)為病理生理學(xué)和病理學(xué)提供了有價(jià)值的見(jiàn)解 許多疾病的代謝基礎(chǔ)。
檢測(cè)精靈非放射性 糧農(nóng)組織的測(cè)定基于底物辛酰輔酶A的氧化。生成 NADH與四唑鹽INT還原為甲胺素偶聯(lián)。 紅色甲臜的強(qiáng)度與糧農(nóng)組織的增加成正比 活動(dòng)。測(cè)定溶液和底物應(yīng)等分儲(chǔ)存在 -80°C.
Assay Genie檢測(cè)精靈脂肪酸氧化檢測(cè)試劑盒是一種高度靈敏的試劑盒 用于定量測(cè)量脂肪酸的比色法 細(xì)胞和組織中的氧化。
這種檢測(cè)方法利用 高可溶性辛酰輔酶A底物，可實(shí)現(xiàn) 脂肪酸氧化與長(zhǎng)鏈低溶性的測(cè)量 底物如18C不飽和脂肪酸油酸酯。
上圖：脂肪酸氧化測(cè)定：組織 裂解物由健康的倉(cāng)鼠心臟和 與心力衰竭相關(guān)的TO2倉(cāng)鼠模型。裂解物 用于測(cè)定和脂肪酸氧化水平 量化。
下圖：脂肪酸氧化測(cè)定： 辛酰輔酶A是底物，而不是反應(yīng)的產(chǎn)物。請(qǐng) 見(jiàn)圖。
細(xì)胞/組織提取物的制備：
1.用冰冷的磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）洗滌~106細(xì)胞兩次， 并從細(xì)胞沉淀中去除PBS。細(xì)胞沉淀應(yīng) 儲(chǔ)存在-80oC.組織樣品應(yīng)用PBS洗滌至 去除血細(xì)胞，這可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不一致。
2.通過(guò)稀釋 1x 細(xì)胞裂解液制備足夠的 10x 細(xì)胞裂解液 用冰冷的dH 2 O溶液。加入 50 – 100 μl 冰冷的 1x 細(xì)胞裂解 細(xì)胞沉淀溶液。通過(guò)上下移液提取細(xì)胞 （溫和）。將裂解物留在冰上5分鐘 間歇性輕微激動(dòng)。如果裂解物是粘稠的，添加更多的1x細(xì)胞 裂解溶液并重復(fù)移液。在 以最大速度冷藏微量離心機(jī)5分鐘。回收上清液 用于測(cè)定。將組織在 1x 細(xì)胞裂解液中勻漿，并裂解 通過(guò)離心澄清。每 25.0 毫升 5x 使用 ~1 毫克組織 用于組織勻漿的細(xì)胞裂解溶液。
3.進(jìn)行蛋白質(zhì)測(cè)定以確定樣品蛋白質(zhì)濃度。 通過(guò)用冰冷的 1x 稀釋來(lái)標(biāo)準(zhǔn)化樣品蛋白質(zhì)濃度 細(xì)胞裂解液至1 – 3毫克/毫升。將蛋白質(zhì)樣品保存在冰上 次。凍融的粗蛋白裂解物可表現(xiàn)出酶還原 活動(dòng)。裂解物應(yīng)儲(chǔ)存在-80oC。 注意：不要使用緩沖液 含有還原劑或SDS。
試劑解凍：
將解凍的糧農(nóng)組織化驗(yàn)溶液和20倍糧農(nóng)組織底物放在冰上。輕輕攪拌 移液前的溶液。重要的是要盡量減少時(shí)間 試劑解凍。使用后立即冷凍溶液。
對(duì)照溶液和反應(yīng)溶液的制備：
1.對(duì)照溶液由1份dH 2 O和20份混合制備 糧農(nóng)組織化驗(yàn)解決方案，例如25μldH 2 O與500μlFAO化驗(yàn)混合 溶液。測(cè)定過(guò)程中將新鮮制備的對(duì)照溶液保持在冰上。
2.反應(yīng)溶液通過(guò)混合1份20x FAO底物和 20份糧農(nóng)組織化驗(yàn)溶液，例如25μl 20x糧農(nóng)組織底物與 500μl糧農(nóng)組織測(cè)定溶液。將溶液放在冰上并立即使用。 每個(gè)蛋白質(zhì)樣品用50μl對(duì)照溶液和50μl處理 反應(yīng)溶液分為兩組。
Assay Genie檢測(cè)精靈脂肪酸氧化檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用
研究健康和病理狀態(tài)（脂質(zhì)代謝）的代謝途徑和過(guò)程。
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究。
遺傳性疾病的研究，例如脂肪酸氧化障礙（FAODs）*。
心血管疾病的研究，例如心力衰竭。
胎兒發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞能量代謝的研究。
脂肪酸氧化在癌癥代謝中的影響。
*此試劑盒僅供研究使用，不能用于診斷 人類(lèi)疾病。
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
PACO06340-50 | CDK2 Antibody (PACO06340) | 50ug | assaygenie |
BN00773-200 | Nitrite Assay Kit (Griess Reagent) (BN00773) | 200T | assaygenie |
BR00001 | Fatty Acid Oxidation (FAO) Assay Kit | 48assays | assaygenie |
CNDL00059 | Canine Luteinizing Hormone (LH) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
CPRT1431 | Human Alkaline Phosphatase Placental, BioActive | 10ug | assaygenie |
HUDL01657 | Human Keratin 5 (KRT5) ELISA Kit | 96assays | assaygenie |
HUDL01980 | Human N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUDL02031 | Human Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUDL02141 | Human Osteopontin (OPN) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUES02568 | Human HMGB-1(High mobility group protein B1)ELISA Kit (HUES02568) | 96T | assaygenie |
HUFI00005 | Human CXCL1 / GRO alpha ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI00120 | Human Fibronectin ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI00187 | Human KIM-1 / TIM-1 ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI00842 | Human PRG4 (Proteoglycan 4) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI03466 | Human Hsd17b13 (17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 13) ELISA Kit (HUFI03466) | 96Assays | assaygenie |
HUFI04779 | Human LTA (lipoteichoic acids) ELISA Kit (HUFI04779) | 96 Assays | assaygenie |
HUFI07203 | Human PIP5K3 ELISA Kit (HUFI07203) | 96T | assaygenie |
MKES00061 | Monkey C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit (MKES00061) | 96T | assaygenie |
MODL00688 | Mouse Interleukin 19 (IL-19) ELISA Kit | 96assays | assaygenie |
MODL01409 | Mouse Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOES00941 | Mouse CYPD (Cyclophilin D) ELISA Kit (MOES00941) | 96assays | assaygenie |
MOFI00232 | Mouse HMGB1 ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI00389 | Mouse TREM2 ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI00738 | Mouse COL4 / Collagen IV ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI01251 | Mouse 4-HNE (4-Hydroxynonenal) ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI01271 | Mouse ANA(Anti-nuclear Antibody) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
RTEB0255 | Rat Complement C4 (C4) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
SBRS0735 | Human IL-18 Pharmaassaygenie ELISA Kit (SBRS0735) | 96T | assaygenie |
SBRS1436 | Mouse IL-36 alpha/IL-1F6 PharmaGenie ELISA Kit (SBRS1436) | 96assays | assaygenie |
SBRS1438 | Mouse IL36G PharmaGenie ELISA Kit (SBRS1438) | 96assays | assaygenie |
ACAM00001 | assaygeniePlex Filter Plate Washer | 1plate | assaygenie |
AGIM0017-100 | dsDNA monoclonal antibody (AGIM0017) | 100ugin100ul | assaygenie |
BA0018 | Beta-Glucosidase Activity Assay Kit (BA0018) | 100T | assaygenie |
BN01039 | NNMT Inhibitor Screening Assay Kit | 100T | assaygenie |
BN01132 | Factor XIa Activity Assay Kit (Colorimetric) (BN01132) | 100t | assaygenie |
CBCAB00008 | PLCG1 (Phospho-Tyr783) Colorimetric Cell-Based ELISA Kit | 96T | assaygenie |
CBCAB00151 | RIPK2 (Phospho-Ser176) Colorimetric Cell-Based ELISA Kit | 96T | assaygenie |
CNFI00009 | Canine IFN gamma ELISA Kit | 96T | assaygenie |
CPRT1430 | Human Alkaline Phosphatase Placental | 5ug | assaygenie |
HDBS0035-100 | Anti-CEACAM5 (labetuzumab biosimilar) mAb | 100uL | assaygenie |
HDPT0216 | Human TLR8 Recombinant Protein (hFc Tag) | 50UG | assaygenie |
HDPT0417 | Human TLR9 Recombinant Protein (hFc Tag) (HDPT0417) | 50ug | assaygenie |
HMFI0001-C | Hamster IL-6 ELISA Kit (HMFI0001-C) | 96T | assaygenie |
HMFI0009 | Hamster TNF-A(Tumor Necrosis Factor-A) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HMFI0010-S | Hamster IFN-gamma (Interferon gamma) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUEB0609 | Human Thyroglobulin (TG) ELISA Kit | 96 Assays | assaygenie |
HUEB0701 | Human Fibroleukin (FGL2) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUEB1201 | Human Huntingtin (HTT) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUEB1478 | Human DNA replication factor Cdt1 (CDT1) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUEB2269 | Human Integrin beta-1 (ITGB1) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUES02462 | Human IgA1 (Immunoglobulin A1) ELISA Kit (HUES02462) | 96T | assaygenie |
HUES03247 | Human SC5b9 (soluble terminal complement complex) ELISA Kit (HUES03247) | 96T | assaygenie |
HUF103043 | Human DLL4(Delta-like protein 4) ELISA Kit | 46.875pg/ml | assaygenie |
HUFI00932 | Human MYB ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI01781 | Human SIRT6 ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
HUFI03028 | Human Galactose-Deficient IgA1(Galactose-Deficient IgA1) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI03088 | Human 2, 5-OAS(2, 5-oligoadenylate synthetase) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI03139 | Human SAKL(Soluble alpha-Klotho) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI03207 | Human PRGN(Progranulin) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
HUFI03434 | Human HEK 293 HCPs (HEK 293 host cell proteins) elisa kit (HUFI03434) | 96T | assaygenie |
HUMB00024 | Bevacizumab (Avastin®) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
KES0051 | Rabbit CCL4 (MIP-1 beta) DIY ELISA Kit | Upto10Plates | assaygenie |
KPRT0425 | Recombinant Bovine PDGF-BB Protein | 5ug | assaygenie |
MAES0082 | Acid Phosphatase (ACP) Activity Assay Kit | 96T | assaygenie |
MKES00010 | Monkey A beta1-40 (Amyloid Beta Peptide 1-40) ELISA Kit (MKES00010) | 96T | assaygenie |
MKES00024 | Monkey CT (Calcitonin) ELISA Kit (MKES00024) | 96T | assaygenie |
MKES00054 | Monkey ANG II (Angiotensin II) ELISA Kit (MKES00054) | 96T | assaygenie |
MKES00064 | Monkey TL1A (Tumor Necrosis Factor Related Ligand 1A) ELISA Kit (MKES00064) | 96assays | assaygenie |
MKF100032 | Monkey IgE ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MKFI00008 | Monkey APOC3 / Apolipoprotein C-III ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MKFI00010 | Monkey Complement C3 / C3 ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MKFI00030 | Monkey IFN gamma ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MKFI00032 | Monkey IgE ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MKFI00044 | Monkey Insulin ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MODL00049 | Mouse Albumin (ALB) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOEB0659 | Mouse Glycosylated hemoglobin A1c (HbA1c) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOEB1627 | Mouse Pyridoxal phosphate phosphatase (Pdxp) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOEB1723 | Mouse IL-2rb ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOEB2528 | Mouse 5-Hydroxyindoleacetic acid (5HIAA) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOEB2554 | Mouse Methylmalonic Acid (MMA) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOES00214 | Mouse CYPA (cyclophilin A) CLIA Kit (MOES00214) | 96assays | assaygenie |
MOES00215 | Mouse CYPB (Cyclophilin B) CLIA Kit (MOES00215) | 96assays | assaygenie |
MOFI00245 | Mouse SLC25A5 / ADP / ATP translocase 2 ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI00383 | Mouse Glucagon ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI00393 | Mouse SARDH / Sarcosine dehydrogenase ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI00854 | Mouse GLP1/Glucagon Like Peptide 1 ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI00882 | Mouse HB-EGF / HBEGF ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI00927 | Mouse IL-15 ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI00962 | Mouse Lactoferrin ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI01258 | Mouse IL-8 ELISA Kit (MOFI01258) | 96T | assaygenie |
MOFI01283 | Mouse Calprotectin(Calprotectin) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
MOFI01318 | Mouse IL-31 ELISA Kit | 96Assays | assaygenie |
MOFI01356 | Mouse IL-36 gamma ELISA Kit | 96T | assaygenie |
PACO04460 | Phospho-NPM1 (T234) Antibody | 50ug | assaygenie |
RPPB3176 | Human CHMP4A Recombinant Protein (RPPB3176) | 5ug | assaygenie |
RPPB4377 | Human RAC1 Recombinant Protein (RPPB4377) | 50ug | assaygenie |
RPPB5129 | Human VPS24 Recombinant Protein (RPPB5129) | 20ug | assaygenie |
RTDL00076 | Rat Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
RTDL00568 | Rat Interleukin 6 (IL-6) ELISA Kit | 96T | assaygenie |
RTDL00768 | Rat N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) ELISA Kit | 96assays | assaygenie |
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