ComplementTech C3b說明書

名稱： iC3b

規(guī)格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實(shí)際濃度見分析證書)

類型 冷凍液體

純度： >90%由SDS-PAGE

緩沖區(qū)： 10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數(shù)。 A280 nm在1.0 mg/mL時的=為1.03

分子量： 176000Da (3鏈)

防腐劑： 無，0.22µm過濾

存儲： - 7 0oC或以下。避免凍融。

根源 正常人血清 (經(jīng)認(rèn)證的HBsAg和HCV、HIV1和HIV-II抗體檢測 均為陰性) 。

預(yù)防措施 在處理人體血液制品時要采取常規(guī)的預(yù)防措施。

一般說明

iC3b (滅活的C3b) 來源于C3b。C3b向iC3b的轉(zhuǎn)化幾乎破壞了C3b上幾乎所有的 功能結(jié)合位點(diǎn)。C3b本身是由所有三種補(bǔ)體途徑(Law，S。K.A.和里德，K。B.M. (1995 ) )，當(dāng)天然C3被裂解時，釋放C3a。在因子H存在的因子下，因子I對C3b進(jìn)行裂解制備 iC3b。當(dāng)C3b在溶液中游離時，H和I的裂解迅速，當(dāng)它附著在表面時，速度較慢。如果 C3b切割到iC3b，因子I的其他輔助因子也允許切割，這包括兩個膜蛋白CR1 (CD35) 和 MCP (CD46) 。因子I可以在alpha鏈中的兩個位置切割C3b，如果兩個位點(diǎn)都被切割， 則釋放一個小片段 (C3f，2000Da) 。如果C3b前體附著在一個表面上，iC3b就會留在 那個表面上。本公司銷售的iC3b由流體相C3b制成，不能附著在表面上。表面結(jié)合的 C3b和iC3b通過共價鍵與目標(biāo)相連，共價鍵可以是酯鍵，也可以是酰胺鍵。酯鍵是不穩(wěn) 定的，導(dǎo)致粒子逐漸釋放。在補(bǔ)體激活過程中產(chǎn)生的大多數(shù)C3b永遠(yuǎn)不會附著在表面上 ，因為它的硫酯與形成水的流體相C3b發(fā)生反應(yīng)。表面結(jié)合的iC3b及其分解產(chǎn)物C3d被 淋巴細(xì)胞和吞噬細(xì)胞上的許多受體識別，這些受體利用這些配體刺激吞噬作用和抗原 呈遞給適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。iC3b的受體分別是b細(xì)胞上的CR2 (CD21) 和吞噬細(xì)胞 上的CR3 (CD11b/CD18) (Dodds，A。W.和Sim，R。B.編輯 (1997) ；莫利，B。J.和沃 爾波特，M。J. (2000)).ic3b-受體相互作用的結(jié)果之一是靶標(biāo)特異性b細(xì)胞和t細(xì)胞群 體的擴(kuò)大。

物理特性和結(jié)構(gòu)

分子量：17.6萬道爾頓， 由三個二硫鍵連接鏈組成。人的iC3b呈糖基化狀態(tài) ( ~值為2.8%) 。C3b的阿爾法啟動鏈被因子I切割，產(chǎn)生兩個片段 (63000和39000Da) ， 它們都與beta鏈 (75000Da) 相連，但沒有變化。根據(jù)因子I可能存在一些異質(zhì)性 (Morley，B。J.和沃爾波特，M。J. (2000) ；法律，S。K.A.和里德，K。B.M. ( 199 5) ；多茲，A。W.和Sim，R。B.

編輯 (1997) ；摩根，B.P。ed. (2000)).如果因子I分裂兩次，C3f (2000Da) 被 釋放，其鏈約為61000、39000和75000Da。iC3b的pI約為。5.7.

功能

正如它的名字所暗示的， “滅活的C3b"失去了C3b表達(dá)的大部分功能。C3b具 有因子B、因子P、因子H、因子I、C5、DAF (CD55) 、MCP (CD46) 和受體CR1的結(jié)合 位點(diǎn)，而iC3b經(jīng)歷了結(jié)構(gòu)變化，破壞了許多這些位點(diǎn)(Gros，P.等。 (2008) ；多茲 ，A。W.和Sim，R。B.編輯 (1997) ；蘭布里斯，J。D. (1988)).最關(guān)鍵的是，iC3b 不能結(jié)合因子B，因此不能參與補(bǔ)體激活。然而，iC3b仍然可以通過結(jié)合C5參與C5轉(zhuǎn) 化酶的活性，它仍然可以結(jié)合正確蛋白，它已經(jīng)獲得了與CR3受體相互作用的能力， 這對吞噬和t細(xì)胞帶t細(xì)胞反應(yīng)的抗原呈遞很重要(Ghannam A等。(2008)).

測定

目前還沒有針對iC3b的功能檢測方法。SDS凝膠用于確定蛋白質(zhì)的鏈結(jié)構(gòu)。

在體內(nèi)

在補(bǔ)體激活過程中，C3b產(chǎn)生于C3的蛋白水解裂解。在侵襲性補(bǔ)體激活過程中 (在膿毒癥和感染部位) 可能會形成高濃度的C3b，但大部分是液體期C3b。在血液中 ，因子H和I迅速裂解C3b形成iC3b。雖然iC3b對胰蛋白酶樣酶非常敏感，但它在血漿 或血清中的壽命很長 (半衰期數(shù)小時) 。由于血漿中含有過量的蛋白酶抑制劑，因此 游離凝血酶、纖溶酶或其他活性蛋白酶很少，iC3b仍然是iC3b。然而，在血液中，人 類紅細(xì)胞上的CR1受體誘導(dǎo)了因子I的第三次切割，從而從C3dg中釋放C3c(Dodds，a。 W.和Sim，R。B.編輯 (1997) )。