advancedbiomatrix Glycosil說明書

advancedbiomatrix Glycosil說明書

產品描述

Glycosil ® 透明質酸是HyStem ®和Hystem ® -C 水凝膠試劑盒的一種成分，可單獨購買。Glycosil ® 是一種硫醇修飾的透明質酸，是天然細胞外基質 (ECM) 的成分。Glycosil ®與 Gelin-S ® 或 ECM 蛋白（如層粘連蛋白、膠原蛋白或纖連蛋白）一起用于大多數 3-D 細胞培養和組織工程應用。  

Glycosil ®（硫醇改性的透明質酸鈉）包裝在 1 mL 或 5 mL 小瓶中，內含 10 mg 或 50 mg 材料。小瓶被氮氣覆蓋并在輕微真空下進行細菌和內毒素測試。 

產品描述

Gelin-S ® 是硫醇改性明膠（變性膠原蛋白），是 HyStem ® -C 和 HyStem-HP 水凝膠試劑盒的組成部分。大多數細胞在僅 Gelin-S 的水凝膠上不能很好地生長。相反，Gelin-S 應與 Glycosil ®  （硫醇修飾的透明質酸）或 Heprasil ®  （硫醇修飾的透明質酸和硫醇修飾的肝素）結合使用。重構的 Gelin-S 在 15 至 37°C 時仍保持液態。

用于制造 Gelin-S 的明膠來自 A 型明膠，Bloom 250，源自豬皮。

Gelin-S®（硫醇改性明膠）包裝在 5.0 mL 小瓶中，每瓶含 50mg。小瓶被氮氣覆蓋并處于輕微真空下。

將 Gelin-S 存放在未開封的原始小瓶中，在 -20 °C 下最多保存一年。不要打開 Gelin-S 瓶蓋，因為它們會在氧氣存在下交聯。使用注射器和針頭將 DG 水添加到小瓶中。

注意：建議將每個小瓶全部重新配制。

使用指南

Gelin-S 是通過將凍干固體溶解在 DG 水（或任何無菌、脫氣、去離子水）中來制備的。重組后，它將在 1x 磷酸鹽緩沖鹽水 (PBS) 中，pH ~7.4。用于溶解的 DG 水的量取決于小瓶。

Gelin-S 應按以下方式制備：

1. 讓 Gelin-S 小瓶達到室溫。

2. 在無菌條件下，使用注射器和針頭，將 1 mL 的 DG 水添加到“1 mL Gelin-S 小瓶"中，或將 5 mL 的 DG 水添加到“5 mL Gelin-S 小瓶"中。

3. 將小瓶水平放置在搖桿或搖床上。固體*溶解需要 <40 分鐘。升溫至 37°C 或更低和/或輕輕渦旋將加快溶解時間。解決方案將是澄清和輕微粘稠的。

4. 即使添加了 Extralink ® ，Gelin-S 也不會形成水凝膠。要形成水凝膠，必須將其與 Extralink 和 Glycosil ®或 Heprasil ®混合。

產品描述

Heprasil ® 是硫醇修飾的透明質酸和硫醇修飾的肝素，是 HyStem ® 水凝膠試劑盒的組成部分。透明質酸是天然細胞外基質 (ECM) 的主要成分。肝素也以硫酸乙酰肝素的形式存在于 ECM 中。大多數細胞不會附著在僅 Heprasil 的水凝膠上。對于大多數 3-D 細胞培養和組織工程應用， Heprasil 必須與 Gelin-S ® 或 ECM 蛋白（如層粘連蛋白、膠原蛋白或纖連蛋白）結合使用。

凝膠
化重組 Heprasil 在 15 至 37°C 時保持液態。在沒有交聯劑的情況下，Heprasil 將通過形成二硫鍵形成水凝膠；然而，凝膠化時間超過二十四小時。如果 Extralink ® 用于交聯 Heprasil，膠凝時間約為 20 分鐘，無需低溫或低 pH 步驟。用磷酸鹽緩沖鹽水 (PBS) 或細胞培養基稀釋 Heprasil 可以增加其膠凝時間。

產品描述

Extralink® Lite（PEGDA，聚乙二醇二丙烯酸酯）0.5 mL 小瓶含有 2.5 mg 二丙烯酸化 PEG，2.5 mL 小瓶含有 12.5 mg。小瓶被氮氣覆蓋并處于輕微真空下。

Extralink ® 是分子量為 3500 Da 的聚乙烯二丙烯酸酯 (PEGDA)。它是一種硫醇反應性交聯劑，可與 Glycosil ®、Heprasil ® 和 Gelin-S ® 中的硫醇基團共價反應形成粘彈性水凝膠。Extralink ® Lite 小瓶經過 >80% 的丙烯酸化處理，并作為 HyStem ® 水凝膠套件中的交聯組分提供。 

Gelation
Extralink ® Lite 用于化學交聯 Glycosil。膠凝時間從短至 5 分鐘到長達數小時不等，具體取決于使用的 Extralink 的量和 Glycosil 的濃度/稀釋度。

外鏈®對于不包含 Gelin-S 的應用程序，使用 Lite 代替 Extralink。Glycosil 的較高相對濃度需要較少的交聯劑來模擬 HyStem-C 和 HyStem-HP 的膠凝時間和剛度。

貯存

Extralink： 在 -20°C 下將 Extralink 存放在未開封的原始小瓶中長達一年。重組的 Extralink 溶液可在 -20 °C 下儲存約一個月。

注意：建議將每個小瓶全部重新配制。

產品描述

PEGSSDA 使研究人員能夠以非酶的方式快速、溫和地溶解 HyStem® 水凝膠，從而輕松恢復生長在水凝膠頂部或內部的細胞或球體。PEGSSDA含有兩個內部二硫鍵，用少量還原劑（如N-乙酰半胱氨酸或谷胱甘肽）迅速還原，導致凝膠液化。

PEGSSDA 是一種五嵌段 PEGDA 分子，由四個 PEG 分子 (MW 2000 Da) 和兩個相互交叉的二硫鍵組成。只有外部 PEG 分子被丙烯酸化。最終分子量約為 8500 Da。與 PEGDA 一樣，PEGSSDA 是一種硫醇反應性交聯劑，可與 Glycosil ®、HyStem、Heprasil ®和 Gelin-S ® 中的硫醇基團發生共價反應，形成粘彈性水凝膠。PEGSSDA在水中凍干。

只需將 Extralink 或 Extralink-Lite 替換為 PEGSSDA 即可用于 HyStem 套件。

也可根據要求提供散裝非無菌 PEGSSDA。

貯存

在 -20°C 下將 PEGSSDA 存放在未開封的原始小瓶中長達一年。重組溶液可在 -20°C 下保存約 1 個月。

產品描述

聚乙二醇二丙烯酸酯 (PEGDA) 水凝膠是揭示基本細胞生物學的有力工具，因為它們被認為是生物惰性的（“空白石板"），并且它們的機械性能可以在很大的模量范圍內變化。

PEGDA 是一種新興的組織工程和再生醫學支架，因為聚合可以在室溫下快速發生，并且需要低能量輸入，具有高含水量，有彈性，并且可以定制以包含各種生物分子。

PEGDA 是一種交聯劑重復聚合物交聯劑，丙烯酸酯化程度 >80%。它可以在我們的 HyStem 系統中以低濃度用作硫醇反應性交聯劑，或在自由基鏈光引發劑和光源存在的情況下用于制造僅 PEGDA 的水凝膠。僅 PEG 的凝膠通常不支持細胞附著，而無需結合細胞附著位點。

應用
常規和 3-D 細胞培養
組織工程
光刻

在 -20°C 下將 PEGDA 存放在未開封的原始小瓶中長達一年。重組的 PEGDA 溶液可在 -20°C 下保存約 1 個月。

通過將凍干固體溶解在 DG 水中制備 PEGDA。PEGDA 水凝膠 (1 mL) 應按以下方式制備：

1. 讓 PEGDA 達到室溫。

2. 在無菌條件下，將 1.0 mL DG 水添加到 100 mg PEGDA 小瓶中，制成 10% (w/v) 溶液。

3. 顛倒幾次以溶解。溶液將是透明的并略微粘稠。

4. 要消毒，請通過 0.2 微米過濾器過濾。

5. 將所需體積的光引發劑添加到 PEGDA。將小瓶放在搖桿或搖床上，讓固體*溶解（大約 10-20 分鐘）。

6. 保持溶液避光，直到準備好交聯。將溶液移液到所需格式（即 96 孔板）和光交聯。

7. 水凝膠特性可能會因曝光時間和光的類型而異。確保光交聯燈靠近水凝膠溶液。

8. 在 -20 °C 下冷凍未使用的 PEGDA 溶液并避光。

產品描述

Advanced BioMatrix 提供的細胞培養水經過多個純化處理步驟，以確保質量、一致性和可重復性。凈化后，水會進一步處理以提取溶解氧，以盡量減少可能影響某些水凝膠溶解和聚合的 O 2 自由基的影響。該產品經過無菌過濾和無菌和內毒素測試。水以 10 或 20 mL 的體積包裝，瓶中的頂部空間最小，以隨著時間的推移保持其完整性和質量。