?scicons 10040200說(shuō)明書

背景 
在過(guò)去十年中，我們的雙鏈 RNA (dsRNA) 抗體已被廣泛用于檢測(cè)和表征具有 dsRNA 基因組或中間體的動(dòng)植物病毒。此外，抗 dsRNA 抗體可用作檢測(cè)病原體的診斷工具，包括在石蠟包埋的固定組織樣本中進(jìn)行檢測(cè)（Richardson 等人，2010 年）。J5 IgG2b 抗體識(shí)別 dsRNA 的親和力和特異性與我們的 J2 抗體非常相似（參見(jiàn) Schonborn 等，1991），但具有不同的同種型——因此可以更靈活地同時(shí)檢測(cè) dsRNA 與其他標(biāo)記物，尤其是在免疫熒光顯微鏡下，并已用于檢測(cè)魚病毒傳染性胰腺壞死病毒 (IPNV)（Levican-Asenjo 等，2019）或 Vero 細(xì)胞中的 ECMV 的復(fù)制中間體。J5 抗體可以檢測(cè)所有測(cè)試形式的 dsRNA，包括來(lái)自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無(wú)關(guān)，只要 dsRNA 的長(zhǎng)度超過(guò) 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。只要dsRNA的長(zhǎng)度超過(guò)40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。只要dsRNA的長(zhǎng)度超過(guò)40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測(cè)試。

同義詞： Mouse anti dsRNA

來(lái)源 
雌性 DBA/2 小鼠腹膜內(nèi)注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物，在*弗氏佐劑中乳化。在幾次加強(qiáng)后，脾細(xì)胞與 Sp2/0-Agl4 骨髓瘤細(xì)胞融合以產(chǎn)生雜交瘤克隆。

產(chǎn)品 
小鼠單克隆抗體 J5 可識(shí)別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長(zhǎng)度大于或等于 40 bp。dsRNA 識(shí)別與抗原的序列和核苷酸組成無(wú)關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 J5 識(shí)別，盡管在某些測(cè)定中它對(duì) poly 的親和力(I).poly(C)比其他dsRNA抗原低約10倍

配方： 凍干樣品應(yīng)用 200 µl 無(wú)菌蒸餾水復(fù)溶。然后將 mAb 以 1 mgr/ml 的濃度存在于不含任何穩(wěn)定劑或防腐劑的 PBS 中。作為凍干程序的結(jié)果，重建的抗體可能含有少量聚集體形式的變性蛋白質(zhì)，這可能會(huì)干擾某些應(yīng)用，例如免疫組織化學(xué)（例如，通過(guò)提供高背景）。因此，我們強(qiáng)烈建議在使用和使用上清液之前對(duì)重組的抗體進(jìn)行離心（微量離心）。

純化方法： A蛋白-瓊脂糖親和層析。

純度： 凝膠電泳純 IgG 抗體。

濃度： 重構(gòu)后的濃度： A280 nm 測(cè)定的 1.00 mg/ml（A280 nm = 1.47 對(duì)應(yīng)于 1 mg/ml 抗體）

應(yīng)用 
小鼠單克隆抗體 J5 可用于 ELISA、dsRNA 免疫印跡、免疫親和層析以及在某些系統(tǒng)中還可用于免疫組織化學(xué)（參見(jiàn)參考資料）。對(duì)于任何特定應(yīng)用，抗體的最佳工作稀釋度應(yīng)通過(guò)滴定確定。請(qǐng)注意，dsRNA 免疫印跡之前的核酸分離必須通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行，因?yàn)閺沫傊悄z印跡后檢測(cè)的靈敏度要低得多。不得用于臨床目的。僅供體外使用。

儲(chǔ)存 
重構(gòu)后的抗體應(yīng)分裝并儲(chǔ)存在 -20 °C 或 -70°C。加入 10 mM 疊氮化納后，未稀釋的抗體也可以在 +4 °C 下短時(shí)間保存。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，mAb 應(yīng)保持冷凍。應(yīng)避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。當(dāng)保持凍干時(shí)，產(chǎn)品在 -20°C 或 -70°C 下可保持穩(wěn)定 10 年。

運(yùn)輸條件： 在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。