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haemtech 0030說(shuō)明書(shū)
人因子VII
的域結(jié)構(gòu)表示為人因子VII的域結(jié)構(gòu)，其中：GLA =包含γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域，EGF =包含與人表皮生長(zhǎng)因子同源的序列的區(qū)域，CATALYTIC DOMAIN =包含絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。Xa因子裂解VII因子形成VIIa的位點(diǎn)用箭頭表示。
| 尺寸 | 20微克 |
|---|---|
| 公式 | 50％甘油/水（v / v） |
| 存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
|---|---|
| 純度 | 通過(guò)SDS-PAGE，> 95％ |
| 活性測(cè)定 | 凝血測(cè)定 |
|---|---|
| 保質(zhì)期（正確存放） | 12個(gè)月 |
人因子VII是在肝臟中合成的單鏈依賴(lài)維生素K的血漿糖蛋白（1-3）。在分泌到血液中之前，維生素K依賴(lài)性羧化酶進(jìn)行的翻譯后修飾會(huì)在分子的NH2末端部分產(chǎn)生十個(gè)羧基谷氨酸（gla）殘基，從而促進(jìn)細(xì)胞膜結(jié)合。凝血期間凝血因子VII被蛋白水解活化為絲氨酸蛋白酶凝血因子VIIa。凝血因子，凝血因子IXa，凝血因子X(jué)a或凝血因子X(jué)IIa可以激活凝血因子VII。激活導(dǎo)致單鏈分子在精氨酸152的COOH末端側(cè)裂解，從而產(chǎn)生NH2末端衍生的輕鏈（Mr = 20,000）和COOH末端衍生的重鏈（Mr = 30,000）通過(guò)一個(gè)二硫鍵共價(jià)結(jié)合 輕鏈區(qū)包含gla結(jié)構(gòu)域以及與人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）同源的兩個(gè)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子（組織因子）可能以鈣依賴(lài)性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上，形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA，并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。以及兩個(gè)與人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）同源的生長(zhǎng)因子域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子（組織因子）可能以鈣依賴(lài)性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面，形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。以及兩個(gè)與人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）同源的生長(zhǎng)因子域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子（組織因子）可能以鈣依賴(lài)性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面，形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子（組織因子）可能以鈣依賴(lài)性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上，形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子（組織因子）可能以鈣依賴(lài)性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上，形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。可以以鈣依賴(lài)性方式在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。可以以鈣依賴(lài)性方式在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子X(jué)ase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X(jué)向因子X(jué)a的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列（4）。因子VII與包括因子IX，因子X(jué)和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。
人因子VII使用常規(guī)技術(shù)（2）和免疫親和色譜（5）的組合進(jìn)行純化。純化的蛋白質(zhì)以50％（體積/體積）的甘油/水的形式提供，應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過(guò)SDS-PAGE分析確定純度，并在VII因子凝血測(cè)定中測(cè)量活性。
| 凝膠 | Novex 4-12％Bis-Tris |
|---|---|
| 加載 | 人因子VII，每泳道1 µg |
| 緩沖 | 拖把 |
| 標(biāo)準(zhǔn) | 參見(jiàn)BluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa） |
| 本土化 | 等離子體 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 血漿濃度 | 0.5 µg / ml（2）-（基于活度測(cè)量） | |||||
| 行動(dòng)方式 | Zymogen; 絲氨酸蛋白酶因子VIIa的前體 | |||||
| 分子量 | 50,000（2） | |||||
| 消光系數(shù) |
| |||||
| 等電點(diǎn) | 4.8-5.1（6）-（基于牛因子VII的分析） | |||||
| 結(jié)構(gòu)體 | 單鏈，NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域，兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域 | |||||
| 碳水化合物百分比 | 13％（7）-（基于牛因子VII的分析） | |||||
| 翻譯后修飾 | 1個(gè)β-羥基天冬氨酸（8），10個(gè)gla殘基（9） |
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