mypols Volcano2G DNA聚合酶

 Volcano2G DNA polymerase

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

• Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級(jí)版本，具有進(jìn)一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。該酶是一種經(jīng)過工程改造的，極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和結(jié)合的DNA聚合酶，可通過定向的人工進(jìn)化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板（無需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟）直接促進(jìn)“零步” RT-PCR，因?yàn)樵谘h(huán)PCR延伸步驟中逆轉(zhuǎn)錄與DNA擴(kuò)增同時(shí)進(jìn)行。這還允許在高溫下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，從而大程度地減少了在高溫下融化的RNA中強(qiáng)大的二級(jí)結(jié)構(gòu)所遇到的問題。

Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動(dòng)劑配制的，具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的工程穩(wěn)定的熱穩(wěn)定DNA聚合酶和穩(wěn)健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于適體的熱啟動(dòng)劑設(shè)計(jì)用于在低溫下（例如，在移取反應(yīng)混合物時(shí)）阻斷非特異性DNA聚合酶活性，但會(huì)在高于50-55°C的溫度下分解，從而釋放出現(xiàn)已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚合酶作為5 U / µl甘油庫存與適當(dāng)?shù)?x Volcano反應(yīng)緩沖液一起運(yùn)輸，該緩沖液針對(duì)60-300 bp的擴(kuò)增子進(jìn)行了優(yōu)化。

Volcano2G逆轉(zhuǎn)錄酶可以可靠地從≥1 ng總RNA輸入中檢測RNA靶標(biāo)。它不需要Mn ^2+即可  獲得宜活性。但是，可以通過向反應(yīng)中添加Mn ²⁺來進(jìn)一步優(yōu)化某些檢測方法（建議范圍為0.5-1 mM，未提供Mn ²⁺）。

該產(chǎn)品以涼爽包裝出售。建議在到達(dá)-20°C時(shí)存放產(chǎn)品。

RT-PCR活性：已對(duì) Volcano3G RT-PCR Mix進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測試。在實(shí)時(shí)PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴(kuò)增出一個(gè)151 bp的片段（HPRT1 mRNA），并可視化為單個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度通過蛋白質(zhì)特異性染色確定。

帶有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步協(xié)議節(jié)省時(shí)間

跳過逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。 

Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶，非常穩(wěn)定，在95°C下的半衰期> 40分鐘。

靈敏的RNA檢測

當(dāng)添加實(shí)時(shí)PCR染料時(shí)，Volcano2G DNA聚合酶也可用于實(shí)時(shí)PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域，使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示，通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。

來自細(xì)胞的直接RT-PCR

為了可靠地進(jìn)行細(xì)胞RNA的RT-PCR，樣品制備步驟*。然而，這些步驟費(fèi)力，費(fèi)時(shí)并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液，您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費(fèi)力的RNA制備。

節(jié)省時(shí)間和金錢

VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液具有簡化的“零步驟”工作流程，使您能夠規(guī)避費(fèi)力的純化和提取步驟，從而節(jié)省了時(shí)間和金錢。

出色的靈敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x實(shí)現(xiàn)了低至單個(gè)細(xì)胞的檢測靈敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個(gè)隆德人中腦（LUHMES）細(xì)胞中檢測到GAPDH mRNA。

具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。