biodatacorp 105997說(shuō)明書

UPTT™ 試劑

部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑（非活化）

內(nèi)源性血漿凝固的接觸激活

貨號(hào)：105997

產(chǎn)品描述

UPTT 試劑是緩沖兔腦磷脂的凍干制劑，標(biāo)準(zhǔn)化磷脂濃度≤0.1%。UPTT 試劑不含活化化合物。

預(yù)期用途

UPTT 試劑預(yù)期用于進(jìn)行（非活化）體外部分凝血活酶時(shí)間 (PTT) 試驗(yàn)。本試驗(yàn)檢測(cè)了器械或浸提液對(duì)貧血小板或無(wú)血小板血漿 1,2 或某些血漿凝血因子缺乏的內(nèi)源性凝血途徑的激活作用。1,2,3,4

原理

全血暴露于異物后，在不存在 Ca + + 的情況下發(fā)生接觸活化。4,5,6 UPTT 通過(guò)檢測(cè)血凝塊形成時(shí)間，測(cè)量通過(guò)內(nèi)源性途徑參與血漿凝血活酶生成的血漿因子。7.8

應(yīng)一式三份運(yùn)行試驗(yàn)。將暴露于試驗(yàn)器械后的結(jié)果與未處理血漿和陰性對(duì)照進(jìn)行比較。

注意事項(xiàng)

UPTT 試劑不用于人類或動(dòng)物診斷試驗(yàn)或程序。

在整個(gè)試劑制備、樣本采集、樣本制備和分析過(guò)程中遵守標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施。9

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室政策處置銳器和生物廢物。

提供的材料

UPTT 試劑 20 x 3.0 mL

試劑儲(chǔ)存

凍干 UPTT 試劑-在 2-8 ℃ 下儲(chǔ)存，直至失效日期。復(fù)溶 UPTT 試劑在 2-8 ℃ 下儲(chǔ)存于密封的原始容器中時(shí)，可穩(wěn)定 7 天。

需要但未提供的材料

1. 純化水，pH 5.3-7.2（蒸餾、去離子或試劑級(jí)）

2. 移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3. 氯化鈣，0.025 M (C/N 100989)

4. 檸檬酸鈉，0.11M (C/N 100994)

5. 凝血質(zhì)控血漿

復(fù)溶

復(fù)溶前將小瓶加熱至室溫。

1. 輕敲小瓶，去除粘附在膠塞上的材料

2. 取下鋁密封件

3. 取下瓶塞，用 3.0 mL 純化水復(fù)溶小瓶?jī)?nèi)容物。

4. 更換塞子，倒置小瓶，充分混合內(nèi)容物。使用前靜置至少 15 min，以確保內(nèi)容物*再水化。

復(fù)溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中儲(chǔ)存時(shí)可穩(wěn)定 7 天。

試驗(yàn)血漿的采集和制備

用于 UPTT 的供試樣本必須是采用抗凝全血制備的無(wú)血小板或貧血小板血漿。2、11、12

標(biāo)本采集

應(yīng)小心采血。一旦采血裝置中可見血液，松開止血帶。避免停滯、溶血、組織液污染或接觸玻璃。

真空標(biāo)本采集管技術(shù)（推薦）12

1. 使用獲批用于實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的帶翼針采集裝置

2. 將血液采集至含有 0.11M 枸櫞酸鈉抗凝劑的塑料真空標(biāo)本采集管中

部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑（非活化）

內(nèi)源性血漿凝固的接觸激活

105997

3. 輕輕顛倒試管 4-5 次，混勻標(biāo)本

注：驗(yàn)證使用的抗凝劑類型和濃度。顏色頂部不隨檸檬酸鹽濃度的不同而變化。

注射器技術(shù)（替代程序）13

1. 使用獲批用于實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的帶翼針采集裝置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免過(guò)度抽吸。

3. 從收集裝置中取出針頭

4. 立即輕輕將血液分配至聚丙烯管中，該管含有 1.0 mL 0.11M 檸檬酸鈉（血液與抗凝劑比例為 9:1）

5. 蓋上管蓋，輕輕顛倒 4-5 次，混勻。

6. 試驗(yàn)前，將樣品在室溫下多保存兩小時(shí)。

樣品制備

血小板功能離心機(jī)

1. 將樣本放入 PDQ

2. 選擇 PFP 設(shè)置

3. 按下開始

臺(tái)式離心機(jī)：貧血小板血漿制備 12,14,15,16

1. 將標(biāo)本放入離心機(jī)

2. 以 2500 xg 離心標(biāo)本 15 min。

收獲樣品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除貧血小板血漿；不得干擾血沉棕黃層。

3. 將樣本轉(zhuǎn)移至塑料管和蓋上

4. 檢測(cè)前，樣品可在 (15-28 °C) 下儲(chǔ)存多 2 小時(shí)

• 應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室政策使用丟棄管。

• 根據(jù)標(biāo)本的紅細(xì)胞壓積，調(diào)整標(biāo)本體積，使血液抗凝劑比例為 9:1。紅細(xì)胞壓積需要調(diào)整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作過(guò)程中的任何時(shí)間點(diǎn)，請(qǐng)勿將全血標(biāo)本或供試品暴露于玻璃容器中。14,16

• 請(qǐng)勿對(duì)可見溶血、黃疸或脂血樣本進(jìn)行 UPTT。12

測(cè)試程序儀器

部分凝血活酶時(shí)間終點(diǎn)可通過(guò)手動(dòng)凝血方法和大多數(shù)凝血分析儀檢測(cè)。分析儀試驗(yàn)方法與用于進(jìn)行活化部分凝血活酶時(shí)間試驗(yàn) (aPTT) 的方法相同。按照生產(chǎn)商說(shuō)明進(jìn)行試驗(yàn)。必須使用實(shí)驗(yàn)室建立的 UPTT 參考范圍。10

• 所有試驗(yàn)均應(yīng)重復(fù)進(jìn)行三次。

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品。

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品。

• 必須精確控制待評(píng)價(jià)器械與試驗(yàn)血漿接觸的時(shí)間。

手冊(cè)

1. 移取 0.1 mL 供試或?qū)φ昭獫{至試驗(yàn)比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血漿 2 min。

2. 在 37 ℃ 下預(yù)孵育 0.025 M 氯化鈣。

3. 移取 0.1 mL UPTT 試劑，置于含有血漿的試驗(yàn)比色皿中。

4. 將血漿/試劑混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案規(guī)定進(jìn)行孵育。

5. 加入 0.1 mL 預(yù)孵育的氯化鈣，同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。

6. 記錄凝血時(shí)間

• 所有試驗(yàn)均應(yīng)重復(fù)進(jìn)行三次

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品

• 必須精確控制待評(píng)價(jià)器械與試驗(yàn)血漿接觸的時(shí)間

質(zhì)量控制

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遵循普遍接受的質(zhì)量控制規(guī)范。應(yīng)在檢測(cè)的每一天運(yùn)行質(zhì)控品。

1. 每個(gè)供試器械樣品必須使用兩個(gè)水平的陰性對(duì)照。

2. 每個(gè)供試器械樣品必須運(yùn)行一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照

如果使用凝血分析儀進(jìn)行 UPTT，則必須遵循制造商關(guān)于正確操作、質(zhì)量控制和維護(hù)的說(shuō)明。

各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)確立的實(shí)驗(yàn)室程序，通過(guò)進(jìn)行重復(fù)研究來(lái)確定每批 UPTT 試劑和質(zhì)控血漿的驗(yàn)收限值。與活化部分凝血活酶時(shí)間 (APTT) 結(jié)果以與本人所用相同的方式運(yùn)行比較。

每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須確定每批 UPTT 試劑和質(zhì)控血漿的參考范圍和驗(yàn)收限值。當(dāng) UPTT 試劑批號(hào)改變時(shí)，需要進(jìn)行 10 次交叉研究。

準(zhǔn)確度、精密度和重現(xiàn)性

正常血漿和質(zhì)控品水平 1、2 和 3 的 CV 應(yīng)小于 5%。

UPTT 檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度可能受到許多因素的影響。顯著的方案和實(shí)驗(yàn)室間差異來(lái)自用于測(cè)量凝血終點(diǎn)的凝血系統(tǒng)的數(shù)量。5,15 可能影響檢測(cè)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變量包括用于試劑復(fù)溶的純化水的 pH 值、移液技術(shù)、孵育時(shí)間和溫度、試劑污染或試劑批號(hào)變化。定期進(jìn)行的 18,19 次定期質(zhì)量控制檢測(cè)將有助于識(shí)別可能發(fā)生的任何變化并導(dǎo)致錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果。

結(jié)果

UPTT 試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)報(bào)告為凝血終點(diǎn)（秒）。應(yīng)一式三份運(yùn)行供試品和對(duì)照品，并在將其與實(shí)驗(yàn)室確立的參考范圍進(jìn)行比較之前對(duì)結(jié)果取平均值。14,16,17,22

結(jié)果中應(yīng)包括 p 值，作為檢驗(yàn)有效性的指標(biāo)。

在統(tǒng)計(jì)學(xué)上比較未暴露血漿的平均結(jié)果與暴露于器械的血漿的結(jié)果。為了通過(guò)，器械統(tǒng)計(jì)必須具有≥0.05 的 p 值。

預(yù)期值

正常血漿：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：當(dāng)在光電分析儀上使用正常質(zhì)控品血漿進(jìn)行測(cè)試時(shí)，UPTT 結(jié)果將大于 60 秒。接觸激活將縮短該時(shí)間。由于分析儀和方案之間的操作差異，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須建立 UPTT 的參考范圍。實(shí)驗(yàn)方案、樣品制備和終點(diǎn)檢測(cè)方法可能會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。

局限性

1. 溶血、黃疸或脂血血漿可能產(chǎn)生錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果。

a. 會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的溶血、黃疸或脂血濃度取決于分析儀。17,21

2. 冷凍血漿樣本可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果。

• 血液與抗凝劑的比例不正確可能導(dǎo)致虛假的檢測(cè)結(jié)果。對(duì)于紅細(xì)胞壓積值高于 53% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例降低，對(duì)于紅細(xì)胞壓積值低于 25% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例增加。2,7

參考文獻(xiàn)

1. ANSI/AAMI/ISO10993-4 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)-第 4 部分：與血液相互作用試驗(yàn)選擇，可從美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì) (ANSI) 獲得，地址：25 W. 43rd St.,4th Floor,New York,NY 10036，http://www.ansi。。ｏｒｇ.

2. ASTM 標(biāo)準(zhǔn) ASTM F2382-04 (2010)“評(píng)估血管內(nèi)醫(yī)療器械材料的部分凝血活酶時(shí)間 (PTT) 的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法”ASTM International,West Conshohock-en,PA,2003,DOI:10.1520/F2382-04R10，www.astm。。ｏｒｇ.

3. Braybrook JH，編輯，醫(yī)療器械和材料的生物相容性評(píng)估。J > Wiley&Sons.英國(guó)西蘇塞克斯。1997 年

4. Vogler,EA 和 Siedlecki,CA.接觸激活血漿凝固。生物材料。30 (10) :1857–1869.2009 年 4 月。

5. Poller L. aPTT 檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化。當(dāng)前狀態(tài)，Scand JHaematol.25 [增刊 37] :49,1980.

6. Gad,MC.藥品和醫(yī)療器械的安全性評(píng)價(jià)：監(jiān)管指南。DOI:10,3007/978-1-4419-7449-5. Springer Science and Business Media.紐約州紐約市。2010 年

7. 危害，DM。版本。臨床血液學(xué)和止血基礎(chǔ)。第 3 版。第 542 頁(yè)。F. A. Davis and Company,Philadelphia.1997 年。

• Mannucci PM：部分凝血活酶時(shí)間試劑檢測(cè)輕度血友病患者的多中心評(píng)價(jià)。在 Triplett DA 中，凝血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化：概述。美國(guó)病理學(xué)家學(xué)會(huì)，Skokie,IL 1982。

9. 臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì) (CLSI)。臨床實(shí)驗(yàn)室安全性；批準(zhǔn)指南

-第三版。CLSI 文件 GP17-A3 (ISBN 1-56238-797-9)。臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所，950 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012

10. Moffat,KA 等人1. 對(duì)血小板計(jì)數(shù)正常或減少的樣本進(jìn)行光傳輸血小板聚集試驗(yàn)的參考區(qū)間確定方法的評(píng)價(jià)。血栓栓塞。2008 年 7 月；100 (1) :134-45。

11. ANSI/AAMI/ISO10993-12:2009 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)。第 12 部分：樣品制備與參照樣品。ASTM International,West Conshohocken,PA,

12. 臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì) (CLSI)。用于檢測(cè)基于血漿的凝血試驗(yàn)和分子止血試驗(yàn)的血液標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和處理；批準(zhǔn)指南-第 5 版。CLSI 文件 H21-A5 (ISBN1-5238-657-3)。臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)。940 West Valley Road,Suite 1400.韋恩。賓夕法尼亞州 19087-1898 美國(guó)，2008 年。

13. Hougie C：凝血的生物化學(xué)。In Triplett DA:Laboratory Evaluation of Coagula-tion,Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

14. Langdell,RD,Wagner,RH 和 Brinkhous,KW。部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定。第 103 頁(yè)。在托坎廷斯 LM 和 Kazal LA。編輯。血液凝固。Grune and Stratton,NY.1964 年

15. Sabo MG：凝血儀器和試劑系統(tǒng)。In Triplett DA:Laboratory Evaluation Of Coagulation,pg 3. Society Of Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

16. Triplett DA,Harms CS:Procedures For The Coagulation Laboratory,pg 7,Chicago,1981.

17. Harker LA：止血手冊(cè)。F.A. Davis Company,pg 62,Philadelphia,1974.

18. Westgard JO,Barry PL,Hunt MR,Groth T:A Multi-Rule Shewhart Chart For Quality Control 493-501,1981.

19. 臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì) (CLSI)。當(dāng)熟練度測(cè)試不可用時(shí)的實(shí)驗(yàn)室測(cè)試評(píng)估；批準(zhǔn)指南-第二版。CLSI 文件 GP29-A2（ISBN 1-

56238-673-5）。臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2008。

20. Ratnoff OD,Forbes CD eds:Disorders of Hemostasis.W.B. Saunders Co.第 2 版，費(fèi)城，1991 年。

21. 臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì) (CLSI)。溶血、黃疸和脂血/濁度指數(shù)作為臨床實(shí)驗(yàn)室分析干擾指標(biāo)；批準(zhǔn)指南。CLSI 文件 C56-A. 臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012。

22. Westgard,JO 和 Hunt,MR。方法比較研究中常用統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)的使用和解釋。臨床化學(xué) 19:49-57/1973。

產(chǎn)品可用性

注：提供定制批次。有關(guān)價(jià)格和交貨，請(qǐng)咨詢客戶服務(wù)部。

本產(chǎn)品保證按照標(biāo)簽和 BIO/DATA CORPORATION 文獻(xiàn)所述執(zhí)行，BIO/DATA CORPORATION 不承擔(dān)任何其他目的適銷性或適用性的暗示保證，在任何情況下，BIO/DATA CORPORATION 均不對(duì)上述明示保證引起的任何間接損害負(fù)責(zé)。