TriAltus Bioscience CRISPR蛋白

Trialtus Bioscience，LLC（www.trialtusbioscience。。ｃｏｍ）為生命科學家提供了用于生產(chǎn)和純化基因工程蛋白的工具。我們新穎的親和標簽系統(tǒng)只需一步即可提供超高純度和高產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。CL-7親和標簽蛋白純化系統(tǒng)已獲得阿拉巴馬大學伯明翰分校（UAB）的TriAltus Bioscience的許可，現(xiàn)已可商購。

活化的Im7樹脂包含高度特異性的彈性Im7結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域與融合到目標蛋白的CL7標簽（約16 kDa）結(jié)合。用適當?shù)牡鞍酌盖懈詈螅械鞍讖呐cIm7結(jié)合的CL7中釋放。有1、2、5和15毫升體積的沉降樹脂（50％懸浮液）可用。

TriAltus的ImM7活化樹脂多可進行100次活化，在重復使用過程中保持1：1的摩爾結(jié)合比。Im7活化樹脂已用于純化多種蛋白質(zhì)-包括膜和多亞基蛋白質(zhì)。

簡便性–在單個純化步驟中，此方案可產(chǎn)生具有高產(chǎn)量，高純度和高活性水平的純化蛋白。

可重用性-該IM7樹脂是可重復使用，在容量沒有可觀察到的損失。

彈性- 該IM7樹脂保留了1：在各種條件下，包括各種鹽和去污劑濃度多個再活化后1摩爾的結(jié)合比。

規(guī)格書

顆粒大小| 交聯(lián)的garose 6B 珠（45 - 165 μM ）

PH值穩(wěn)定性| Im7蛋白在pH 3-10的珠子上穩(wěn)定。但是，CL7 / Im7結(jié)合僅在pH 4.2 – 10時穩(wěn)定。

鹽穩(wěn)定性| ≤ 4M NaCl的測試

裝訂容量| 35-40 mg CL7 / mL 樹脂

儲存/運輸濃度| 50/50緩沖液/樹脂漿料。在2、4、10和30毫升漿液中分別加入1、2、5和15毫升的沉降樹脂。

推薦工作溫度| 4°C 或室溫

活化細節(jié)| 要除去CL7蛋白并重新活化樹脂，請用Gdn-HCl洗滌色譜柱，將其交換為生理緩沖液。

附加信息：靶蛋白特性（例如蛋白大小，構(gòu)象和濃度）；流速（即較低的流速可能會增加結(jié)合能力）；其他參數(shù)（例如pH和溫度）會影響色譜柱的結(jié)合能力。

中國科學家使用TriAltus Bioscience的CL-7純化系統(tǒng)純化CRISPR相關(guān)蛋白

阿拉巴馬州伯明翰（2018年8月29日）— TriAltus Bioscience，LLC今天宣布，中國湖北大學的科學家只需一步即可成功地從大腸桿菌中共表達和純化了核糖核蛋白復合物，包括Cas9和Cas12a CRISPR相關(guān)蛋白。使用該公司許可的CL-7凈化技術(shù)。湖北科學家于7月下旬發(fā)表了他們的工作結(jié)果。

TriAltus Bioscience執(zhí)行官兼聯(lián)合創(chuàng)始人Bob Shufflebarger說：“該團隊在CRISPR蛋白方面的成功獨立驗證了我們的CL-7純化系統(tǒng)，可以有效地純化用于治療研究的一些重要的蛋白。” “我們相信這項技術(shù)將加強科學研究，解決使用基因工程蛋白質(zhì)的一些挑戰(zhàn)，并終幫助降低與生物制藥生產(chǎn)相關(guān)的行業(yè)成本。”

湖北省科學家在論文中寫道：“通過利用超高親和力CL7 / Im7純化系統(tǒng)，我們在體內(nèi)和體外實現(xiàn)了具有深層核酸酶活性的純Cas RNP的一步純化，表明該方法具有很高的實用價值。具有大規(guī)模，低成本，短時間制備CRISPR相關(guān)核酸酶的潛力。”

該論文還指出：“ [此方法簡便，經(jīng)濟高效，可用于制備其他CRISPR相關(guān)核酸酶。”

CRISPR-簇狀規(guī)則間隔的短回文重復序列的首字母縮寫-是一種基因編輯工具，可有效且特異性地改變生物體內(nèi)的基因。CRISPR相關(guān)（Cas）蛋白（例如Cas9和Cas12a）是CRISPR系統(tǒng)的必需組件，研究人員正越來越多地使用它們來尋找治療癌癥，HIV和鐮狀細胞病等疾病的潛在方法。

TriAltus Bioscience聯(lián)合創(chuàng)始人，UAB的生物化學和分子生物學教授Dmitry Vassylyev博士領(lǐng)導了發(fā)明CL-7技術(shù)的團隊。瓦西里耶夫（Vassylyev）在五個臭名昭著的具有挑戰(zhàn)性的生物分子上測試了該方法，結(jié)果*。該研究成果于2017年發(fā)表在《美國國家科學院院刊》（PNAS）上。