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    當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > cytoskeleton BK165-S說(shuō)明書

    cytoskeleton BK165-S說(shuō)明書

    更新時(shí)間:2019-02-18      點(diǎn)擊次數(shù):1944

     

    cytoskeleton BK165-S說(shuō)明書

    新的Signal-Seeker™:PTM檢測(cè)試劑盒,抗體和試劑

    簡(jiǎn)單 

    全面的套件可大限度地縮短優(yōu)化時(shí)間,同時(shí)大化PTM檢測(cè)

    質(zhì)量

    的靈敏度和度,可以自信地識(shí)別低豐度的PTM

    積分

    使用相同的系統(tǒng)研究多個(gè)PTM

     

    Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測(cè)試劑盒
    (10次檢測(cè))

    BK165-S

    Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測(cè)試劑盒
    (30種檢測(cè))

    BK165

    Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒
    (10次檢測(cè))

    BK163-S

    Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒
    (30種檢測(cè))

    BK163

    Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測(cè)試劑盒
    (10種檢測(cè))

    BK160-S

    Signal-Seeker™磷酸酪氨酸檢測(cè)試劑盒
    (30種檢測(cè))

    BK160

    Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測(cè)試劑盒
    (10種檢測(cè))

    BK162-S

    Signal-Seeker™SUMOylation 2/3檢測(cè)試劑盒
    (30種檢測(cè))

    BK162

    Signal-Seeker™泛素化檢測(cè)試劑盒
    (10種檢測(cè))

    BK161-S

    Signal-Seeker™泛素化檢測(cè)試劑盒
    (30種檢測(cè))

    BK161

     

     

     

    新的Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測(cè)試劑盒(10種檢測(cè))

    10種檢測(cè)方法(Cat。#BK165-S)

    Signal-Seeker™系列產(chǎn)品的開發(fā)旨在簡(jiǎn)化專家和非專業(yè)人士對(duì)關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng),可從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質(zhì)。然后使用針對(duì)靶蛋白的抗體通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

     

    產(chǎn)品用途包括

    • 調(diào)查瞬態(tài)監(jiān)管機(jī)制
    • 測(cè)量多種途徑成員蛋白的信號(hào)傳導(dǎo)事件 
    • 發(fā)現(xiàn)您感興趣的蛋白質(zhì)的新修改
    • 深入了解監(jiān)管機(jī)制
    • 測(cè)量?jī)?nèi)源性或瞬時(shí)表達(dá)的蛋白質(zhì)信號(hào)傳導(dǎo)事件

    ?

     

    套件內(nèi)容

    SUMOylation 1試劑盒包含以下組分:

    裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)清除步驟洗步驟洗脫步驟西部一步

     BlastR™裂解緩沖液 

     BlastR™稀釋緩沖液

     BlastR™過(guò)濾器

     蛋白酶抑制劑雞尾酒

     去SUMO化抑制劑雞尾酒

     Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑

     SUMOylation 1 Affinity Beads

     IP控制珠

     

     

     

     

     BlastR™洗滌緩沖液

     

     

     

     

     

     旋轉(zhuǎn)列

     珠子洗脫緩沖液

     

     

     

     

     化學(xué)發(fā)光試劑A.

     化學(xué)發(fā)光試劑B.

     抗SUMO1抗體

     

     

     

     

    示例結(jié)果

    這些套件有很多應(yīng)用,這里我們描述一個(gè)有趣的例子:

    應(yīng)用1:研究重要的SUMOylation 1事件

    與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測(cè)試劑盒免疫沉淀總SUMO1譜

    (A)使用BlastR裂解和過(guò)濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。將1mg每種裂解物與40mg每種SUMO1親和試劑一起溫育:ASM11-珠(Cytoskeleton),21C7(Invitrogen純化的),21C7(DSHB-上清液),D11-珠(Santa Cruz)和綴合的SUMO1 IgG對(duì)照珠。 (CIG03)。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過(guò)SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。使用1:5000的ASM01(Cytoskeleton)抗體和5%牛奶中1:1000的小鼠Trubelot Ultra-HRP二抗,通過(guò)蛋白質(zhì)印跡分析富集的SUMO1樣品。Trueblot secondary用于小化21C7樣品的重鏈和輕鏈檢測(cè)。 

     

    (B):使用ASM11進(jìn)行IP,如圖1A所示。SUMO1修飾的蛋白質(zhì)用ASM01 1:5000顯示,抗小鼠以1:20,000顯示,以突出在64-30kDa范圍內(nèi)SUMO化蛋白質(zhì)的分布,當(dāng)使用未綴合的抗體時(shí),可能被重鏈和輕鏈干擾掩蓋。 IP。

     

     

     

    與舊的SUMO1工具相比,使用Signal-Seeker™SUMOylation 1檢測(cè)試劑盒免疫沉淀SUMO1修飾的靶蛋白

    使用BlastR裂解和過(guò)濾系統(tǒng)獲得HAP1野生型(WT)或SUMO1敲除(KO)裂解物。1毫克每裂解物與40孵育 ASM11珠(細(xì)胞骨架),21C7(DSHB上清液),和共軛SUMO1 IgG對(duì)照珠(CIG03):g各自SUMO1親和試劑的。用蛋白G瓊脂糖珠捕獲21C7抗體以富集SUMO-1修飾的蛋白。通過(guò)SDS-PAGE分離樣品并轉(zhuǎn)移至PVDF。靶蛋白:通過(guò)蛋白質(zhì)印跡分析(A)TFII-I,RanGAP1和(B)schmd1的SUMO1修飾形式。抗兔-HRP標(biāo)記的第二抗體以1:10,000使用。所有三種一抗均為兔多克隆抗體,不應(yīng)結(jié)合來(lái)自IP抗體的重鏈和輕鏈片段。

    在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實(shí)驗(yàn)包括:

    •參與調(diào)節(jié)靶蛋白的SUMOylating和去SUMOylating酶的藥理學(xué)研究。

    •在各種不同的生長(zhǎng)因子或藥物治療下研究SUMO化。

    •檢查SUMOylated靶蛋白與其下游效應(yīng)子的相互作用。

    •檢查SUMOylation 1和其他PTM之間對(duì)目標(biāo)蛋白的串?dāng)_。

     

    上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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