EAE 模型誘導手冊

EAE 模型誘導手冊：

EAE模型是一種以特異性致敏的CD4+T細胞介導為主的，以中樞神經系統內小血管周圍出現單個核細胞浸潤及髓鞘脫失為特征的自身免疫性疾病，是人類多發性硬化（MS）的理想動物模型，在臨床神經免疫學的研究中具有重要意義。

實驗動物的選擇：成年雌鼠C57/BL6小鼠 8周  15只

試劑準備

器材準備

 試劑配制：

1：髓鞘少突膠質細胞糖蛋白MOG (35-55)配制： 將AnaSpec公司的MOG (35-55)多肽蛋白溶于PBS中，濃度為2mg/ml

2: 準備*弗氏佐劑（CFA）：將BD公司的結核菌素H37Ra粉末溶于MPBIO公司的弗氏不*佐劑而成（終濃度為4MG/ML）

 稱取80mg結核菌素H37Ra粉末與不*佐劑混合，注意每次加入一點點不*佐劑，在研缽中充分研磨保證結核菌素*懸浮。

3:將配好的MOG (35-55)溶液和*弗氏佐劑1：1混合（MOG終濃度為1MG/ML),保存于4度冰箱，并于24小時內使用

5：百日咳毒素（PTX）配制： 取一只listlabs公司的百日咳毒素粉末，在管子中加入500ulPBS溶液，濃度為100ug/ml,保存于4度冰箱,使用前再用PBS稀釋100倍

實驗步驟：

1：*天：小鼠胸腹部皮下注射接種MOG和Mtb/CFA混合液 ，復測2-4個點，共150ul/只。再腹腔注射稀釋后的百日咳毒素溶液（濃度為1ug/ml）200ul/只

2：第三天：再加強注射百日咳毒素溶液（濃度為1ug/ml）200ul/只